DMD是由dystrophin基因中一種功能缺失突變所引起的嚴(yán)重肌肉退行性疾病。當(dāng)前除了姑息療法患者能夠獲得的治療非常少。這些酶已迅速成為分子生物學(xué)中的寶貴工具。使得科學(xué)家們能夠在特異位點切割基因，然后改變殘留部分生成他們感興趣的基因組序列。
然而，可編程的核酸酶并非無懈可擊，它們往往會錯誤地編輯與靶序列相似但又存在幾個堿基對差異的序列，由于有導(dǎo)致有害突變的可能性，使得它們無法可靠地應(yīng)用于臨床。
出于這一原因，iPS細胞是一種理想的模型，因為它們可為研究人員提供豐富的患者細胞來測試可編程核酸酶，尋找*條件來將脫靶修飾減至zui少。
研究人員因此構(gòu)建出了在包含這一外顯子的基因組區(qū)域中出現(xiàn)的一些*序列的直方圖。他們在第45號外顯子中發(fā)現(xiàn)一堆*序列。近一半的人類基因組都是由重復(fù)序列組成。因此即便我們找到了一條*序列，一個或兩個堿基對的改變都有可能造成其他的重復(fù)序列，帶來在錯誤區(qū)域進行TALEN或CRISPR編輯的風(fēng)險。為了避免這一問題，我們找到了一個在這一直方圖中居高的一個區(qū)域。
有了這一靶標(biāo)，該研究小組想到了三種策略來修正dystrophin基因的移碼突變：通過連接第43號和46號外顯子達到外顯子跳躍（exon skipping）修復(fù)閱讀框；通過摻入插入突變或缺失（indel）突變來實現(xiàn)移碼，以及在第45號外顯子之前插入第44號外顯子來敲入外顯子。
利用iPS細胞技術(shù)結(jié)合TALEN或CRISPR可以治療DMD?，F(xiàn)在該研究小組的目標(biāo)是將這一方案擴展到其他疾病。證實了TALEN和CRISPR可用來糾正DMD基因突變。我希望可以將這些核酸酶應(yīng)用于糾正其他遺傳疾病如點突變一類的突變。
