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閱讀:609發(fā)布時(shí)間:2015-3-27
卡邁舒生物:如何保存合成的多肽及溶解多肽的方法
多肽一般長(zhǎng)期保存需要避光保存,并應(yīng)保存在-20度,短期可以保存在4度??梢远虝r(shí)間以室溫運(yùn)輸。多肽在-20℃很穩(wěn)定,特別是冷凍干燥并保存在干燥器中,在將它們暴露于空氣之前, 冷凍干燥多肽可以放于室溫。這將是濕度影響減少,當(dāng)無(wú)法冷凍干燥時(shí),的方法是以小的工作樣量存放。
對(duì)于含Cys, Met orTrP的多肽,脫氧緩沖劑對(duì)其溶解*,因?yàn)檫@種多肽可易空氣氧化,在封瓶前,慢慢流過(guò)多肽的氮?dú)饣驓鍤庖矔?huì)降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有這些肽與不含這些有問(wèn)題簡(jiǎn)單的那些肽相比,生命期有限。
溶解多肽是非常復(fù)雜的事情,一般很難一下子確定合適的溶劑。通常是先取一點(diǎn)試驗(yàn),在沒(méi)有確定合適的溶劑前千萬(wàn)不要合部溶解。
下列方法有助于您選擇合適的溶劑:
(1) 判定多肽的電荷特定,設(shè)定酸性氨基酸Asp(D),Glu(E)和C端COOH為-1;堿性氨基酸Lys(K),Arg(R),His(H)及N端NH2為+1,其它氨基酸的電荷為0。計(jì)算出將電荷數(shù)。
(2) 如果凈電荷數(shù)>0,多肽為堿性,用水溶解:如果不溶解或溶解性不大,加入醋酸(10%以上);如果多肽還不能溶解,加入少量TFA(25ul)溶解,然后加入500ul水稀釋。
(3) 如果凈電荷數(shù)<0,多肽為酸性,用水溶解;如果不溶解或溶解性不大,加入氨水(25ul)溶解,然后加入500ul水稀釋。
(4) 如果凈電荷數(shù)=0,多肽為中性,一般需要用有機(jī)溶劑如乙腈,甲醇或異丙醇,DMSO等溶解。還有人建議需要尿素來(lái)溶解疏水性很大的多肽。
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