1.室內(nèi)質(zhì)量控制（室內(nèi)質(zhì)控）
ELISA試劑盒定性試驗(yàn)的臨床意義在于是否檢出病原體，與檢出量無關(guān)，因此質(zhì)量控制（quality control, QC）要保證試驗(yàn)的靈敏度和重復(fù)性。目前定性實(shí)驗(yàn)的質(zhì)控規(guī)則還還存在爭(zhēng)議，目前有以下幾種比較流行的理論：
（1）Levey-Jennings質(zhì)控圖結(jié)合Westgard多規(guī)則質(zhì)控方法 Levey-Jennings質(zhì)控圖以及Westgard多規(guī)則質(zhì)控方法zui早應(yīng)用于生化檢測(cè)的質(zhì)量控制，在ELISA檢測(cè)中仍為探索階段，一般認(rèn)為：①一 次超出3SD；②連續(xù)二次超出2SD；③3～5次連續(xù)處于一側(cè)的2SD之內(nèi)；④5～7次連續(xù)偏向橫軸的一側(cè)，均為失控。目前多采用一次超過2SD作為“告警”，一次超出3SD為“失控”。
另外還有Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則、累積和（CUSUM）質(zhì)控規(guī)則等質(zhì)控方法。
（2）衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心確定的質(zhì)控方法：
室內(nèi)質(zhì)控品：定性測(cè)定的室內(nèi)質(zhì)控品，除了試劑盒附帶的陰陽性對(duì)照外，實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)該選擇至少2個(gè)室內(nèi)質(zhì)控品，其中一個(gè)為弱陽性質(zhì)控品，接近Cutoff值，S/Co值應(yīng)該為2～4之間；另一個(gè)為陰性質(zhì)控品。定量測(cè)定則至少要求一個(gè)水平的質(zhì)控品。
測(cè)定頻度：每臺(tái)儀器，每次檢測(cè)患者樣本時(shí)至少測(cè)定一次室內(nèi)質(zhì)控品；ELISA測(cè)定每塊板都要測(cè)定室內(nèi)質(zhì)控品。
質(zhì)控圖繪制：定性測(cè)定可采用弱陽性質(zhì)控品的S/Co值作質(zhì)控圖。定量測(cè)定參照臨床化學(xué)的繪制方法。質(zhì)控判斷規(guī)則：定性測(cè)定為弱陽性的質(zhì)控品不能測(cè)定為陰性；陰性質(zhì)控品不能測(cè)定為陽性。重復(fù)性的判斷規(guī)則為12S（警告限），13S為失控限。定量測(cè)定參照臨床化學(xué)的判斷規(guī)則。
（3）室內(nèi)質(zhì)控品
室內(nèi)質(zhì)控品的穩(wěn)定以及合適的濃度是運(yùn)用一切質(zhì)控規(guī)則的前提。可選擇S/CO值減去精密度測(cè)定中得到的三倍批間CV%（通常的ELISA試劑盒測(cè)定批間變異（CV%）在15%左右）與該S/CO值的乘積（意即三倍SD）仍大于1的質(zhì)控血清作監(jiān)測(cè)重復(fù)性的室內(nèi)質(zhì)控品用。 計(jì)算公式：S/CO（1-3CV%）=S/CO-3SD。同時(shí)選擇S/CO處于1.5左右的質(zhì)控血清以判斷每次測(cè)定時(shí)試劑盒測(cè)定下限的有效性。
（4） “即刻性”質(zhì)控
一些實(shí)驗(yàn)室不是每天進(jìn)行ELISA項(xiàng)目的檢驗(yàn)，而ELISA試劑盒部分試劑盒效期短 ，用同一批號(hào)試劑盒連續(xù)常規(guī)測(cè)20次，難度較大。采用"即刻法"質(zhì)控統(tǒng)計(jì)方法，只需連續(xù)測(cè)3次，即可對(duì)第3次檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)控。①先將測(cè)定值從小到大排列，X1zui小，Xnzui大 ；②計(jì)算X和s；③計(jì)算SI上限值和下限值。SI上=（Xzui小-X）/S，SI下=（Xzui大-X）/S；④對(duì)照SI表，檢查是否出控。SI上、下限≤規(guī)定值，在控； SI上或下限>規(guī)定值，失控。
⑸室內(nèi)質(zhì)控的現(xiàn)狀及應(yīng)對(duì)措施
免疫質(zhì)控品制作困難，不管是自制血清或者購于其它機(jī)構(gòu)，其穩(wěn)定性和濃度很難達(dá)到要求，加之ELISA影響因素較多，失控后很難找到確切的原因。因此如何開展ELISA試劑盒室內(nèi)質(zhì)控一直困擾著臨床檢測(cè)者?；诖耍煌瑢?shí)驗(yàn)室采取了不同的應(yīng)對(duì)措施，舉例如下：①選擇衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心（NCCL）的低值質(zhì)控血清作為室內(nèi)質(zhì)控品，儲(chǔ)備量以3個(gè)月，采用一次超過2SD作為“告警”，一次超出3SD為“失控”的質(zhì)控規(guī)則，（但該法對(duì)于HBeAb（4NCU/ml）、 HBcAb(2NCU/ml)檢測(cè)不適用，因?yàn)榧词官|(zhì)控在控，其結(jié)果也可能為陰性）；②由于質(zhì)控品不穩(wěn)定，每個(gè)月需重新設(shè)立靶值 ，并根據(jù)常規(guī)CV設(shè)定SD（SD= ×CV¯）；③陰陽性對(duì)照正常，室內(nèi)弱陽性和陰性質(zhì)控正常，且沒有出現(xiàn)“花板”（洗板不干凈，背景顏色深）的情況下認(rèn)為該檢測(cè)批有效，但仍需對(duì)位于“灰區(qū)”和弱陽性的HBsAg、HBeAg結(jié)果及少見模式結(jié)果進(jìn)行復(fù)查，避免偶然因素及孔間差對(duì)結(jié)果造成影響；④若陰陽性對(duì)照、陰性質(zhì)控異常，或出現(xiàn)“花板”的情況則必須整批復(fù)查；⑤在陰陽性對(duì)照、陰性質(zhì)控正常且未出現(xiàn)“花板”的情況下，弱陽性質(zhì)控S/Co超出-3SD時(shí)復(fù)查位于“灰區(qū)”標(biāo)本，超出+3SD時(shí)則復(fù)查弱陽性標(biāo)本；⑥對(duì)于抗體檢測(cè)，尤其是競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)HBeAb、HbcAb，由于不同試劑盒、不同檢測(cè)方法間CO值存在差異及變異系數(shù)大等因素，結(jié)果缺乏可比性，失控后的處理很難滿意地解決，在沒有統(tǒng)一的判斷標(biāo)準(zhǔn)、較小的變異系數(shù)及明確的臨床意義的情況下，引入弱陽性報(bào)告方式在臨床實(shí)踐中證明可行；⑦室內(nèi)質(zhì)控的評(píng)價(jià)：認(rèn)真分析每一次室內(nèi)質(zhì)控失控的原因，并對(duì)各項(xiàng)檢測(cè)的均值，CV等進(jìn)行月與月之間的比較分析，及時(shí)發(fā)現(xiàn)試劑盒檢出能力的變化及操作中存在的問題，并采取適當(dāng)?shù)拇胧﹣硖岣邫z測(cè)的性。
2.室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（室間質(zhì)評(píng)）
室間質(zhì)評(píng)是一種回顧性評(píng)價(jià)，主要是控制實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，也是某些定量實(shí)驗(yàn)量值的溯源。作為臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)積極參與各級(jí)室間質(zhì)評(píng)計(jì)劃，其要點(diǎn)是保證同病人標(biāo)本一樣對(duì)待室間質(zhì)評(píng)物。必須強(qiáng)調(diào)的是室間質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果必須同室內(nèi)質(zhì)控一并分析，查找原因以期改進(jìn)工作中的不足，同時(shí)指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室選擇合適的試劑盒。
