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免疫濁度技術(shù)的類型有哪些

時間：2017/5/23閱讀：1634

(一)VE Elisa Kit透射光免疫濁度技術(shù)
透射光免疫濁度技術(shù)是一種極為簡單的方法，測量方式是測定入射光因反射、吸收或散射后的衰減，讀數(shù)以吸光度A(或光密度OD)表示，A值反映了入射光強度和透射光強度的關(guān)系。免疫復合物直徑為35-lOOnm，這一范圍要求近紫外光處入射光發(fā)出zui大的干擾(zui大吸收峰)，選擇290-410nm波長測。由于抗原抗體結(jié)合后在短時間內(nèi)(<19s)只能形成小復合物，無法進行比濁，需要等幾分鐘到數(shù)小時(>19s)形成可見的復合物，才能進行比濁。為了提高復合物形成速度，加入促聚劑，如4％聚乙二醇(MW：6 000～8 000)，可使復合物形成在3—10rain完成。

(二)終點散射比濁技術(shù)
終點法是指在抗原抗體結(jié)合完成后進行免疫復合物的定性或定量測定。散射比濁應(yīng)用越來越多，且有替代其他免疫定量法的趨勢。散射比濁的原理是依據(jù)雷利(Rayleigh)公式提出的，當復合物較小時(<3×106Dal)(1Dal≈1u)，呈全透射，透射與散射相當。當復合物大于入射光波長的l／20時，形成不對稱的前向散射，在900以前的角度測量散射光皆可取得好的效果，散射光的量代表復合物的量。散射比濁測定法是在光路的50～900角方向上測定散射光的強度。VE Elisa Kit復合物的粒子隨散射角度而異，大的散射光角度適于35一lOOnm的微粒，較小的散射光角度適于100—800nm的微粒測定。散射比濁法在許多自動化儀器上皆有測試程序，大多為終點法，該法穩(wěn)定性好。

(三)速率散射比濁技術(shù)
所謂速率，是在某一單位時間內(nèi)形成大于3×106Dal(1Dal≈lu)以上的復合物量(不是積累數(shù))，當儀器測定到某一單位時間內(nèi)形成的速率下降時，即出現(xiàn)速率峰，該峰值的高低，即代表抗原的量。該技術(shù)有3大特點：①時間快，一般在30～60s就可完成測試；②準確，因其只測定形成速率，抗原越多速率越快；③節(jié)省試劑。此外，速率法的靈敏度與特異性都優(yōu)于終點法，前者的靈敏度比后者高出3個數(shù)量級之多。

(四)粒子強化免疫濁度測定技術(shù)
粒子強化免疫濁度測定技術(shù)的基本原理是選擇一種大小適中、均勻一致的膠乳顆粒，吸附或交聯(lián)抗體后，當遇到相應(yīng)抗原時，則發(fā)生聚集。單個膠乳顆粒在入射光波長之內(nèi)，光線可透過。當兩個膠乳顆粒凝聚時，則使透過光減少，這種減少的程度與膠乳凝集成正比，當然也與待測抗原量成正比。此法靈敏度較高，可達ng／m1或pg／ml水平。該技術(shù)的關(guān)鍵在于兩個方面：首先是選擇適用的膠乳，其大小(直徑)要稍小于波長，用500nm波長者選擇lOOnm顆粒較適合，用585nm波長者則選用100～200nm顆粒為好，目前多用200nm的膠乳顆粒；其次，膠乳與抗體結(jié)合時用化學交聯(lián)雖好，但失活也較嚴重，VE Elisa Kit一般用吸附法即可。

免疫濁度技術(shù)的類型有哪些

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