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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒法檢測研討

時間：2018/1/25閱讀：1222

抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒基因現(xiàn)已整合到銀耳基因組中；RT-PCR成果顯現(xiàn)，在銀耳細胞中可以動物ELISA試劑盒檢測到人胰島素基因的mRNA；Southern雜交成果表明人胰島素基因以單復制的方式整合到銀耳基因組DNA中。本試驗經(jīng)過設置農(nóng)桿菌與銀耳芽孢不同共培育時刻、誘導劑乙酰丁香酮的濃度、銀耳芽孢及農(nóng)桿菌ELISA試劑盒濃度等要素對轉化功率影響，成果在乙酰丁香酮濃度為500μmol/mL、銀耳芽孢濃度為108個/mL、農(nóng)桿菌OD=0.5及共培育時刻為2d時，轉化功率zui高，為310個轉化子/108個銀耳芽孢。轉化子轉接5代后對潮霉素仍有抗性，說明外源基因在銀耳芽孢中可以不亂遺傳。在試驗室已開始樹立的農(nóng)桿菌EHA105介導銀耳轉基因辦法的基礎上。
ELISA試劑盒以銀菌株Tr21-01為動身菌株，經(jīng)過凍融法將帶著有潮霉素磷酸轉移酶（Hph）基因為遺傳符號及人胰島動物ELISA試劑盒素基因（BAC）為意圖基因的質(zhì)粒pBHg-BCA導入根癌農(nóng)桿菌GV3101，LBA4404和AGL-1中，并進一步介導轉究。試驗結L-1具有較高的轉化率；GV3101轉化率較低，且假陽性較高；LBA4404無抗性菌落長出。此成果表明不同的農(nóng)桿菌侵染銀耳芽孢才能具有差異性，且對受體侵染具有一定的特異性。本試驗以農(nóng)桿菌EHA105為參照菌株，抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒對農(nóng)桿菌AGL-1介導轉化銀耳進行研究。基于農(nóng)桿菌介導轉基因受許多要素的影響，本試驗從農(nóng)桿菌與銀耳芽孢共培育時刻、銀耳芽孢濃度、農(nóng)桿菌濃度、誘導劑乙酰丁香酮（AS）的濃度、轉率等方面進行優(yōu)化。ELISA試劑盒其轉化條件優(yōu)化成果為：AGL-1菌液OD值為0.4～0.5，AS誘導培育濃度為250μg/mL、共培育濃度為150μ耳芽孢濃度為10~8/mL，共培育72h轉化率zui高，可達500個/10~8，且陽性菌落為89%；EHA105菌液OD值為0.4～0.5。
LIX1IgG   小鼠血管緊張素原(aGT)
Lpin1 IgG   小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)
Lpin1 IgG   小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)
L-型電壓依賴型鈣通道αIgG   小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)
L-型電壓依賴型鈣通道βIgG   小鼠血管活性腸肽(VIP)
L型鈣通道蛋白a1亞型3體IgG   小鼠溴脫氧核苷(BrdU)
L型鈣通道蛋白a1亞型6IgG   小鼠雄烯二酮(ASD)
L型鈣通道蛋白IgG   小鼠性激素結合球蛋白(SHBG)
L選擇素IgG   小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)
L-脫羧酶IgG   小鼠心鈉肽(ANP)
抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒

抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒法檢測研討

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