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免疫組織化學染色-SP法　

閱讀：5008發(fā)布時間：2011-9-23

免疫組織化學染色-SP法　　 　　
1、脫蠟、水化； 　　2、PBS洗2～3次各5分鐘； 　　3、3%H2O2（80%甲醇）滴加在TMA上，室溫靜置10分鐘； 　　4、PBS洗2～3次各5分鐘； 　　5、抗原修復； 　　6、PBS洗2～3次各5分鐘； 　　7、滴加正常山羊血清封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體。 　　8、滴加Ⅰ抗50μl，室溫靜置1小時或者4℃過夜或者37℃1小時。 　　9、4℃過夜后需在37℃復溫45分鐘。 　　10、PBS洗3次各5分鐘； 　　11、滴加Ⅱ抗40～50μl，室溫靜置，或37℃1小時； 　　12、II抗中可加入0.05%的tween-20。 　　13、PBS洗3次各5分鐘； 　　14、DAB顯色5～10分鐘，在顯微鏡下掌握染色程度； 　　15、PBS或自來水沖洗10分鐘； 　　16、蘇木精復染2分鐘，鹽酸酒精分化； 　　17、自來水沖洗10～15分鐘； 　　18、脫水、透明、封片、鏡檢。


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