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技術(shù)文章

體視熒光顯微鏡的常見使用方法

閱讀:6          發(fā)布時(shí)間:2025-1-9

  體視熒光顯微鏡是顯微鏡的一種,這種顯微鏡以紫外線為光源,通過(guò)觀察被測(cè)物的熒光圖像對(duì)物體作出判斷。目前,熒光體視顯微鏡是活體動(dòng)物體內(nèi)熒光成像技術(shù)的核心技術(shù),被用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。體視熒光顯微鏡是生物、工業(yè)檢測(cè)等領(lǐng)域進(jìn)行定性和定量研究的可靠工具之一,其常見操作方法和注意事項(xiàng)具體如下。

  一、體視熒光顯微鏡的使用方法

  1.將材料片放在載物臺(tái)上,開啟熒光顯微鏡穩(wěn)壓器.然后按下啟動(dòng)組點(diǎn)燃紫外燈,需要注意的是,點(diǎn)燃紫外燈后十五分鐘內(nèi)不能關(guān)閉,關(guān)閉紫外燈后三分鐘內(nèi)不得再啟動(dòng)。

  2. 將激發(fā)濾光片轉(zhuǎn)至v,分色片調(diào)到v,選用495或475nm阻擋濾光片;選用uvFL40、uvFL100熒光接物鏡鏡檢。

  3. 在玻片上加無(wú)熒光油,依次用“40x"“100 x"調(diào)焦鏡檢,呈現(xiàn)熒光。

  4. 因熒光物質(zhì)受紫外光照射時(shí)隨時(shí)間的增長(zhǎng)熒光逐漸變?nèi)?,因此鏡檢時(shí)應(yīng)經(jīng)常變換視野。

  二、注意事項(xiàng)

體視熒光顯微鏡的常見使用方法(圖1)

  (1)嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠說(shuō)明書要求進(jìn)行操作,不要隨意改變程序。

  (2)應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后,接上電源,點(diǎn)燃超高壓汞燈5~15min,待光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后,眼睛適應(yīng)暗室,再開始觀察標(biāo)本。

  (3)防止紫外線對(duì)眼睛的損害,在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。

  (4)檢查時(shí)間每次以1~2h為宜,超過(guò)90min,超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降,熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱;所以,多不得超過(guò)2~3h。

  (5)熒光顯微鏡光源壽命有限,標(biāo)本應(yīng)集中檢查,以節(jié) 省時(shí)間,保護(hù)光源。天熱時(shí),應(yīng)加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再用時(shí),須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點(diǎn)燃光源。

  (6)標(biāo)本染色后立即觀察,因時(shí)間久了熒光會(huì)逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延緩熒光減弱時(shí)間,防止封裱劑蒸發(fā)。

  (7)熒光亮度的判斷標(biāo)準(zhǔn): “-"—無(wú)或可見微弱熒光。“+"—僅能見明確可見的熒光。“++"—可見有明亮


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