蛋白藥物的PEG修飾類型

    根據(jù)化學修飾劑與蛋白質(zhì)之間反應性質(zhì)的不同，修飾反應主要分為?；磻?、烷基化反應、氧化還原反應、芳香環(huán)取代反應等類型，對蛋白質(zhì)進行氨基、巰基和羧基等側鏈基團進行化學修飾。

根據(jù)被修飾化合物包括蛋白質(zhì)、多肽、單克隆抗體分子片段、以及小分子化合物等的不同分子量大小、分子結構以及其理化特性，公司采取不同的聚乙二醇化技術方法對這些化合物進行修飾。修飾方法包括：

1．隨機修飾  
隨機修飾蛋白質(zhì)多以賴氨酸的ε-NH2或α-NH2為修飾目標，由于賴氨酸在蛋白質(zhì)內(nèi)通常數(shù)量較多，這種修飾引起蛋白質(zhì)中多個賴氨酸被修飾，得到的產(chǎn)物是聚乙二醇化修飾異構體的混合物，目前FDA批準的已經(jīng)上市的聚乙二醇化新藥多數(shù)為隨機修飾的產(chǎn)物。

2. 定點修飾 
聚乙二醇化定點修飾，是在隨機修飾的基礎上發(fā)展起來的第二代聚乙二醇修飾技術，通過對修飾方式、PEG修飾劑和反應pH等的優(yōu)化選擇，實現(xiàn)定點修飾，這種修飾所得的產(chǎn)物為均一產(chǎn)物，異構體少，活性保留較好，免疫原性大大降低。

1） N端氨基定點修飾 
由于蛋白質(zhì)、多肽中存在多個α-NH2 和ε-NH2基團，氨基的隨機修飾可能導致藥物活性的明顯下降，這給蛋白質(zhì)、多肽的修飾帶來了障礙。目前我們采取對N端氨基定點修飾，特別是對于遠離活性中心的 N端定點修飾可以有效地保持藥物的原有生物活性。

2） 巰基定點修飾
結合基因工程技術或Mutagenesis等方法，將巰基或一些特異性基團引入到蛋白、多肽預設位點（如不影響活性的糖基化位點、抗原決定簇等）后，再進行對該基團的修飾，這樣就可得到活性保留較高和免疫原性降低的定點修飾產(chǎn)物。

3） 羧基定點修飾
采用帶酰肼活化基團的聚乙二醇衍生物對蛋白質(zhì)、多肽進行羧基基團進行修飾，同樣可以獲得定點的修飾產(chǎn)物。

4）酶催化修飾 
第三代的聚乙二醇化定點修飾技術，采用酶催化手段誘導聚乙二醇分子與蛋白質(zhì)、多肽等分子上特定的位點進行定向修飾。此方法具有以下特點：1）不需要對原蛋白質(zhì)、多肽進行結構改造，保持原化合物的理化特性不變；2）定點修飾；3）工藝簡單，容易大規(guī)?；a(chǎn)和質(zhì)量控制。