紅細(xì)胞滲透脆性（孵育）實(shí)驗(yàn)

時(shí)間：2013-12-20閱讀：969

實(shí)驗(yàn)原理

　　紅細(xì)胞在低滲鹽溶液中，當(dāng)水滲透其內(nèi)部達(dá)一定程度時(shí)，紅細(xì)胞發(fā)生膨脹、破裂。觀察紅細(xì)胞在不同濃度鹽溶液中的溶血程度，可以判斷其對(duì)低滲鹽溶液的抵抗力，這種抵抗能力與紅細(xì)胞表面積與容積的比值有關(guān)，比值小者，紅細(xì)胞抵抗力較小，脆性增加。反之抵抗力增大。

實(shí)驗(yàn)方法

　　材料：

　　1.171.1mmol/LNaCl溶液、蒸餾水

　　2.移液管、試管、水浴箱等

　　方法：

　　1.取12支試管 ,分別按下表加入NaCl溶液和蒸餾水，得不同濃度的NaCl溶液。

試管號(hào)	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
171.1 M NaCl溶液（ml）	0.30	0.35	0.40	0.45	0.50	0.55	0.60	0.65	0.70	0.75	0.80	0.85
蒸餾水(ml)	0.95	0.90	0.85	0.80	0.75	0.70	0.65	0.60	0.55	0.50	0.45	0.40
NaClzui終濃度（mmol/L）	41.0	47.9	54.7	61.6	68.4	75.2	82.1	88.9	95.8	102.6	109.4	116.3
(g/L)	2.4	2.8	3.2	3.6	4.0	4.4	4.8	5.2	5.6	6.0	6.4	6.8

　　2.每管中加入1滴全血（或者肝素抗凝血），輕輕搖勻,在室溫靜置2h后觀察結(jié)果。

　　3.孵育脆性實(shí)驗(yàn)，先將肝素抗凝全血37℃孵育24h后，再做1.2步檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

　　先從高濃度開(kāi)始觀察,上層溶液出現(xiàn)透明紅色者為開(kāi)始溶血管,管底紅細(xì)胞*消失者為*溶血管。

　　參考范圍：

　　開(kāi)始溶血75.2mmol/L-82.1mmol/L（4.4-4.8g/L）NaCl溶液

　　*溶血47.5mmol/L-54.7mmol/L（2.8-3.2g/L）NaCl溶液

　　孵育后

　　開(kāi)始溶血82.1mmol/L-88.9mmol/L（4.8-5.2g/L）NaCl溶液

　　*溶血54.7mmol/L-61.6mmol/L（3.2-3.6g/L）NaCl溶液

注意事項(xiàng)

　　1．CACL必須干燥后準(zhǔn)確稱(chēng)量，用前新配。

　　2.每次試驗(yàn)應(yīng)做正常對(duì)照，其結(jié)果應(yīng)在正常范圍內(nèi)，被檢者與正常對(duì)照開(kāi)始溶血管NaCl溶液濃度相差0.4g/L有診斷價(jià)值。

　　3.所有器具要干燥，血標(biāo)本應(yīng)直接滴入液體內(nèi)，混勻時(shí)不能用力過(guò)大，以避免體外溶血。

　　4.在白色背景下觀察結(jié)果，判斷*溶血試管時(shí)，可低速離心1min后觀察。

　　5.重度貧血患者紅細(xì)胞太少，黃疸患者開(kāi)始溶血管不易觀察，均可取肝素抗凝血以生理鹽水洗滌后，再用生理鹽水配成50%的紅細(xì)胞懸液進(jìn)行檢測(cè)。

　　6．血液標(biāo)本應(yīng)避免用枸櫞酸鹽、草酸鹽和EDTA 鹽抗凝血，以防增加離子強(qiáng)度。如用以上抗凝血標(biāo)本應(yīng)用洗滌紅細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。

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