2014 08-08

細(xì)胞染色方法總結(jié)

Hoechst染色：hoechst可以穿過活細(xì)胞膜與細(xì)胞核結(jié)合有hoechest33342和hoechst33258兩種（主要為凋亡活細(xì)胞）在紫外光下將核染為藍(lán)色。Hoechst染細(xì)胞核會影響共聚焦顯...

2014 08-08

酶組織化學(xué)對組織處理的基本要求

在酶組織化學(xué)研究中，仍需遵循標(biāo)本制作五大基本步驟，即固定或不固定的標(biāo)本、切片(冷凍或不冷凍)、孵育、顯色和顯微鏡下觀察。根據(jù)組織化學(xué)酶檢出的基本步驟。主要有以下5方面影響酶活性：1．選擇zui適溫度、...

2014 08-01

SDS-PAGE實驗試劑配制和操作方法

試劑：1.5x樣品緩沖液(10ml):0.6ml1mol/l的Tris-HCl(pH6.8),5ml50%甘油，2ml10%的SDS，0.5ml巰基乙醇，1ml1%溴酚藍(lán)，0.9ml蒸餾水?？稍?℃保...

2014 08-01

雙向電泳操作步驟

(一)*向等電聚焦1.從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液(I)(不含DTT，不含Bio-Lyte)一小管(1ml/管)，置室溫溶解。2.在小管中加入0.01gDTT，Bio-Lyte4-6、5...

2014 07-25

蛋白質(zhì)鹽析分離法

一、蛋白質(zhì)鹽析分離的原理：蛋白質(zhì)在稀鹽溶液中溶解度會隨著鹽濃度的增大而上升(鹽溶)，當(dāng)鹽濃度增大到一定數(shù)值時，其溶解度又逐漸下降直至蛋白質(zhì)析出。鹽析的發(fā)生是由于鹽濃度增大到一定數(shù)值時使水活性降低，導(dǎo)致...

2014 07-25

分光光度計維護(hù)方法說明

分光光度計是實驗室檢測核酸或者蛋白樣品濃度zui常用的工具之一。儀器使用頻繁，但甚少見到有人維護(hù)。其實，保持分光光度計清潔、無污染是成功操作的關(guān)鍵。JessicaGeisler博士是eppendorf...

2014 07-18

十五種細(xì)胞染色技術(shù)

1.酸性品紅：酸性品紅是酸性染料，呈紅色粉末狀，能容於水，略溶於酒精（0.3%）。是良好的細(xì)胞制染色劑，在動物制片上應(yīng)用很廣，在植物制片上用來染皮層、醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理髓部等薄壁細(xì)胞和纖維素壁。它跟...

2014 07-18

動物染色體標(biāo)本的制備

每一物種的細(xì)胞一般都具有一定數(shù)目、形狀和大小的染色體，在秋水仙素的作用下可使分裂細(xì)胞阻斷在中期，此時染色體形態(tài)zui典型，然后通過低滲、固定、染色等步驟，便可在顯微鏡下呈現(xiàn)出其形態(tài)。實驗用品器具：顯微...

2014 07-10

吖啶橙區(qū)分活細(xì)胞DNA和RNA的熒光組織化學(xué)染色法

吖啶橙《acridineoran。AO)屬于三環(huán)雜芳香類異嗜性陽離子熒光染料，主要以兩種方式與核酸結(jié)合，一是嵌入核酸雙鏈的堿基對之間；二是與單鏈核酸的磷酸發(fā)生靜電相互作用。當(dāng)吖啶橙與DNA或RNA結(jié)合...

2014 07-10

Hoechst 33258染色

1．原理Hoechst33258和Hoechst33342均為非嵌人性熒光染料。它們在活細(xì)胞中DNA聚AT序列富集區(qū)域的小溝處與DNA結(jié)合?；罴?xì)胞或固定細(xì)胞均可從低濃度溶液中攝取該染料。從而使細(xì)胞核著...

2014 07-03

碘化丙啶染色

1．原理碘化丙啶(propidiumiodide，PI)不能穿人完整的活細(xì)胞膜中，即正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞在不固定的情況下對PI拒染，而壞死細(xì)胞由于失去膜的完整性，PI可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)與DNA結(jié)合，根據(jù)此特點...

2014 07-03

DAPI染色

1．原理DAPI為4’，6二脒基-2-苯吲哚(4’，6―diamidino-2―phenylindole)能與雙鏈DNA小槽，特別是AT堿基結(jié)合，也可插入少于3個連續(xù)AT堿基對的DNA序列中。當(dāng)它與雙...

2014 06-27

聚丙烯酰胺凝膠電泳PAGE膠的制備過程

聚丙烯酰胺凝膠電泳可用于蛋白和寡核苷酸的分離，zui常用于蛋白質(zhì)的分離，這里總結(jié)了DNA電泳的各種濃度PAGE膠配制的配方及制備方法。聚丙烯酰胺凝膠電泳簡稱為PAGE（Polyacrylamidege...

2014 06-27

血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳的原理與操作步驟

血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳主要涉及兩個過程：一、血清脂蛋白的預(yù)染;二、預(yù)染的血清脂蛋白電泳分離。本文總結(jié)了血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳、試劑與器材以及操作步驟。原理：將血清脂蛋白用脂類染料(如蘇丹黑或油紅O...

2014 06-21

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的原理及應(yīng)用

簡介：色譜質(zhì)譜的在線聯(lián)用將色譜的分離能力與質(zhì)譜的定性功能結(jié)合起來，實現(xiàn)對復(fù)雜混合物更準(zhǔn)確的定量和定性分析。而且也簡化了樣品的前處理過程，使樣品分析更簡便。色譜質(zhì)譜聯(lián)用包括氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）...

2014 06-21

氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的使用方法

儀器名稱：氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀儀器型號：AgilentGC6890-5975IMS生產(chǎn)廠家：美國Agilent公司使用方法：氣相配有頂空進(jìn)樣器、FID檢測器；質(zhì)譜為四極桿質(zhì)量分析器。具體使用方法：一、開...

2014 06-13

免疫組化

實驗方法原理根據(jù)聚合酶技術(shù)把辣根過氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子結(jié)合在多聚酶上形成多聚物分子,其與待檢的抗原特異性的結(jié)合后，加入底物顯色。實驗材料石蠟切試劑、試劑盒PBS檸檬酸鹽緩沖液蒸餾水增強劑酶...

2014 06-13

細(xì)胞計數(shù)的多種方法

*（也被拼寫*）是一種蝕刻玻璃室提出雙方將舉行石英蓋玻片*室地板0.1毫米以上。為9毫米2的總表面積的計數(shù)室中進(jìn)行蝕刻。圖1、*的尺寸。濃度的計算是根據(jù)上下方的蓋玻片的體積。一個大廣場（參見圖2中的W...

2014 06-05

pH計使用注意

1、一般情況下，儀器在連續(xù)使用時，每天要標(biāo)定一次；一般在24小時內(nèi)儀器不需再標(biāo)定。2、使用前要拉下電極上端的橡皮套使其露出上端小孔。3、標(biāo)定的緩沖溶液一般*次用pH=6.86的溶液，第二次用接近被測溶...

2014 06-05

PH計正確使用與維護(hù)

酸度計簡稱pH計，由電極和電計兩部分組成。使用中若能夠合理維護(hù)電極、按要求配制標(biāo)準(zhǔn)緩沖液和正確操作電計，可大大減小pH示值誤差，從而提高化學(xué)實驗、醫(yī)學(xué)檢驗數(shù)據(jù)的可靠性。一、正確使用與保養(yǎng)電極目前實驗室...