細(xì)胞凝集反應(yīng)

細(xì)胞質(zhì)膜是由蛋白質(zhì)不同程度鑲嵌在脂雙層中所形成的動態(tài)流動結(jié)構(gòu)，蛋白質(zhì)和脂類分子又與寡糖鏈結(jié)合為糖蛋白和糖脂分子，糖蛋白和糖脂分子伸至細(xì)胞表面的分枝狀寡糖鏈在質(zhì)膜表面形成細(xì)胞外被(又稱為糖萼)。許多研究結(jié)果表明：細(xì)胞間的分子識別、細(xì)胞的生長和分化、免疫反應(yīng)和腫瘤發(fā)生等均與細(xì)胞外被(分枝狀寡糖鏈)有關(guān)。凝集素能與細(xì)胞外被的糖分子相連接、在細(xì)胞間形成“橋”，從而達(dá)到細(xì)胞凝集的效果。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1、觀察血細(xì)胞的凝集現(xiàn)象;

2、掌握凝集素促使細(xì)胞凝集的原理。

實(shí)驗(yàn)原理

凝集素(1ectin)是一類含糖的(少數(shù)凝集素例外)并能與糖進(jìn)行專一性結(jié)合的蛋白質(zhì)，它具有凝集細(xì)胞和刺激細(xì)胞分裂的作用。凝集素促使細(xì)胞凝集主要是由于它能與細(xì)胞外被的糖分子相連接、在細(xì)胞間形成“橋”的結(jié)果，且加入與凝集素互補(bǔ)的糖分子可以抑制細(xì)胞間的凝集反應(yīng)。

實(shí)驗(yàn)用品

一、器材

顯微鏡、托盤天平、載玻片若干、滴管2支、離心管2支。

二、試劑

pbs緩沖液：稱取NaCl 7.2g、NazHP04 1.48g、KH2P04 0.43g、加蒸餾水，定容至l000 mL，調(diào)pH值到7.2。

三、實(shí)驗(yàn)材料

1.土豆塊莖。

2.2%的紅細(xì)胞

以無菌方法抽取兔子靜脈血液(加抗凝劑)，用生理鹽水洗5次，每次2000 r/min，離心5 min，zui后按沉淀壓積的紅細(xì)胞體積用生理鹽水配成2%紅細(xì)胞懸液

實(shí)驗(yàn)方法

稱取土豆去皮塊莖2g

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加10 mL PBS緩沖液，浸泡2h(浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素)

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載玻片上滴一滴土豆凝集素

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再滴一滴2%紅細(xì)胞液

↓充分混勻

靜置20 min

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低倍顯微鏡下觀察血球凝集現(xiàn)象

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以PBS液加2%血細(xì)胞懸液作為對照實(shí)驗(yàn)