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中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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平衡鹽溶液

時(shí)間：2016/4/6閱讀：1576
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  絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液基礎(chǔ)上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是的混合物，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`s F12 也包括非必須氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)含有無(wú)機(jī)鹽和代謝添加劑。MEM/F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2，形成神經(jīng)生物學(xué)zui通用的培養(yǎng)基。Dulbecco`s改良培養(yǎng)基――DMEM，現(xiàn)應(yīng)用于快速生長(zhǎng)的細(xì)胞，同MEM含有相同的營(yíng)養(yǎng)成分，但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基，應(yīng)仔細(xì)了解成分表，應(yīng)知道大多數(shù)情形下培養(yǎng)基都有不足。例如，有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有，而這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域，但它對(duì)某些對(duì)敏感的可能有細(xì)胞外毒性損傷的神經(jīng)元而言，則并非選擇，特別是如果神經(jīng)元生長(zhǎng)在缺乏膠質(zhì)的環(huán)境中時(shí)。 F12中含有，據(jù)報(bào)道也有神經(jīng)毒效應(yīng)。

   細(xì)胞在單純的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中不能存活，在特殊類(lèi)型的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基中必須提供某些痕量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及生長(zhǎng)因子才能使細(xì)胞得以生長(zhǎng)并維持生長(zhǎng)狀態(tài)?；A(chǔ)培養(yǎng)基常常要添加血清，血清終濃度多為5~20%。特殊用途的血清來(lái)源須用經(jīng)驗(yàn)確定，廣泛應(yīng)用的血清種類(lèi)有馬血清與胎牛血清。胎牛血清中富含有絲分裂因子，常選其作增殖細(xì)胞用的血清，也用于細(xì)胞系和原代培養(yǎng)。而馬血清常常用來(lái)作有絲分裂后的神經(jīng)元培養(yǎng)。然而，很多人也將胎牛血清用于神經(jīng)元培養(yǎng)，也有人用馬血清來(lái)培養(yǎng)膠質(zhì)細(xì)胞。用大鼠進(jìn)行神經(jīng)元培養(yǎng)的某些研究者喜歡使用同型血清;人類(lèi)的胎盤(pán)血清，亦曾用于神經(jīng)組織的器官類(lèi)型的培養(yǎng)，也用在一些特殊培養(yǎng)種類(lèi)中。

  血清的不同批號(hào)含有不同的成分，所以許多人發(fā)現(xiàn)，應(yīng)該在使用前對(duì)血清進(jìn)行測(cè)試。大多數(shù)試劑商提供樣品，所滿(mǎn)意的批號(hào)即可選用，這樣可以一次得到足夠一年用量的血清，血清在使用前通常在56℃加熱30分鐘，這一過(guò)程稱(chēng)為滅活。

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